产品中心

产品型号:
更新时间:2026-07-16
厂商性质:经销商
访问量:7
服务热线13454455552
Thermo赛默飞乾坤白金SYBR Green预混液
在基因表达分析、病原体检测及SNP基因分型等实时荧光定量PCR实验中,SYBRGreen染料法凭借其操作简便、无需设计特异性探针的优势,成为全球实验室应用最为广泛的检测模式之一。然而,染料法的非特异性结合特性使其对预混液的体系优化要求更高——引物二聚体、错配扩增及荧光背景噪声等问题,直接影响着实验数据的可靠性与可重复性。
乾坤白金SYBRGreen预混液作为赛默飞国产化的高性能产品,通过优化的热启动DNA聚合酶与专门缓冲液体系,在保障高扩增效率的同时显著抑制非特异性产物的形成。该产品以2×即用型浓度提供,包含除模板和引物外的全部qPCR组分,兼容SYBRGreenI染料检测模式,支持ROX参比染料校正,适配主流qPCR仪器平台。从基因组DNA到cDNA模板的定量分析,乾坤白金SYBRGreen预混液均能在宽广的模板浓度范围内保持稳定的扩增效率与线性动态范围,为日常基因定量工作提供标准化的试剂保障。
选择乾坤白金SYBRGreen预混液,意味着为您的荧光定量PCR检测工作选择了一份高灵敏度、低背景且成本可控的国产化预混液方案。
一、优化的热启动酶体系:在保障扩增效率的同时有效抑制非特异性产物
SYBRGreen染料法的特异性高度依赖于引物二聚体和非特异性扩增的有效抑制。乾坤白金SYBRGreen预混液采用化学修饰的热启动DNA聚合酶,在常温配制阶段酶活性被封闭,只有在预变性步骤的高温(95°C)处理后才能释放活性。这一设计有效消除了反应体系配制过程中引物错配产生的非特异性延伸,从源头降低了引物二聚体的形成概率。
在扩增效率方面,该酶的延伸速度和保真度经过专门优化,能够在宽广的模板浓度范围内(从高拷贝到低拷贝靶标)维持≥90%的扩增效率。其2×即用型浓度配方已预混合了dNTPs、MgCl₂、SYBRGreenI染料及反应缓冲液,用户仅需添加模板和引物即可启动反应,大幅减少了实验准备步骤,也降低了多组分分液操作引入的移液误差。
稳定的荧光信号与宽广的线性动态范围:确保定量结果的可靠性
实时荧光定量PCR对荧光信号的稳定性和线性动态范围有着较高的要求。乾坤白金SYBRGreen预混液中的SYBRGreenI染料经过浓度优化,确保在扩增过程中产生的荧光信号与双链DNA产物的量成正比,在整个指数扩增期维持稳定的荧光输出。配合优化的缓冲液体系(包含稳定剂和增强剂),乾坤白金SYBRGreen预混液在连续梯度稀释的标准品中能够维持稳定的线性动态范围(R²≥0.995),覆盖从低拷贝到高拷贝的模板浓度区间,为绝对定量和相对定量实验提供了可靠的计算基础。
在熔解曲线分析中,乾坤白金SYBRGreen预混液能够清晰地区分特异性产物与引物二聚体的熔解峰。在基因表达差异分析的日常实验中,良好的熔解曲线单峰性是判断扩增特异性的重要依据——单峰代表均一产物,双峰或杂乱峰则提示可能存在引物二聚体或非特异性扩增,便于研究人员及时调整实验设计。
二、ROX参比染料校正与仪器兼容性:适配主流qPCR平台
不同品牌、不同型号的qPCR仪器在光学检测系统上存在差异,部分仪器需要ROX参比染料进行孔间信号归一化。乾坤白金SYBRGreen预混液提供不含ROX和含ROX的版本选项,用户可根据所用仪器的型号灵活选择。含ROX版本已在以下主流仪器平台中完成兼容性验证:
需要ROX校正:AppliedBiosystems5700/7000/7300/7500/7700/7900HT、StepOne™/StepOnePlus™等
ROX可选:AppliedBiosystems7500Fast、QuantStudio™系列、RocheLightCycler™480、Bio-RadCFX96™、MJResearch等
这种跨平台兼容性使乾坤白金SYBRGreen预混液能够在同一实验室多品牌仪器共存的场景中实现统一采购,简化了试剂库存管理流程。
三、严格的质量控制与批次一致性
乾坤白金SYBRGreen预混液的每批次产品均经过严格的质量控制检测,以确保批次间性能的一致性和实验数据的可靠性。
无核酸酶污染检测:产品在生产过程中经DNase/RNase污染检测阴性,确保在检测过程中不会因试剂污染而产生假阳性信号或造成靶标降解。
严格的无菌检测:产品均经过严格的微生物培养及内毒素检测,确保微生物限度符合内控标准。
稳定性测试:在4°C避光条件下可稳定储存12个月,-20°C长期保存条件下可保持24个月的保质期。正确的储存方式可以有效保持聚合酶及染料的活性。
四、使用与操作指南:标准化的qPCR配制流程
乾坤白金SYBRGreen预混液为2×即用型浓度,使用时只需解冻、混匀,按比例与模板、引物和无核酸酶水混合即可配制反应体系。
标准qPCR反应体系配制(以20μL反应体系为例)
组分体积(20μL体系)终浓度
2×乾坤白金SYBRGreen预混液10μL1×
上游引物(10μM)0.4–0.8μL0.2–0.4μM
下游引物(10μM)0.4–0.8μL0.2–0.4μM
模板DNA/cDNA1–2μL可变
无核酸酶水补足至20μL—
推荐的qPCR循环程序
步骤温度时间循环数
预变性(热启动激活)95°C2分钟1
变性95°C10秒40
退火/延伸(数据采集)60°C30秒40
熔解曲线分析65–95°C(每步0.5°C递增)5秒/步1
五、关键操作注意事项
避光保存:SYBRGreenI染料对光敏感,建议在使用前才取出预混液,并尽快完成分装和反应体系的配制
使用前充分混匀:解冻后轻轻颠倒混匀数次,确保各组分分布均一(切勿剧烈振荡,避免产生气泡)
引物设计:推荐使用经过熔解曲线验证的引物对,确保单一产物,退火温度建议在58–62°C之间,GC含量40–60%
六、应用场景与用户价值:面向基础与转化研究的通用型荧光定量试剂
乾坤白金SYBRGreen预混液已在多类生命科学研究和临床检测场景中得到验证,尤其适用于需要批量处理样品的基因表达差异分析、病原体核酸检测及miRNA表达谱研究等应用。
基因表达差异分析:配合相对定量(2⁻ΔΔCt法)方案,在肿瘤标志物筛选、药物处理效应评价、信号通路关键节点表达分析等常规基因表达差异检测中,高性能热启动酶和稳定的荧光信号为其提供了技术支撑,其熔解曲线单峰性清晰有助于避免因非特异性扩增导致的假阳性判断。
病原体核酸检测与公共卫生监测:在需要快速筛查大量样本的病原体核酸检测场景中,SYBRGreen染料法凭借其无需探针的设计可显著缩短方法开发周期。在使用公共引物库(如PrimerBank)进行预验证时,乾坤白金SYBRGreen预混液的高扩增效率和低背景特性可帮助研究人员在较短时间内完成引物筛选与体系优化,适用于传染病防控中的早期筛查和公共卫生实验室的日常监测工作。
常规实验室与多仪器兼容场景:对于需要在同一实验室多台不同品牌qPCR仪器上运行的基因定量任务,乾坤白金SYBRGreen预混液提供含ROX与不含ROX两种版本,适配AppliedBiosystems、Bio-Rad、Roche等主流仪器平台,有助于减少因仪器差异引入的荧光信号漂移。该产品的即用型2×配方也便于降低实验人员在高通量板制备过程中的移液误差,是适合日常教学实验室和稳定性考核应用场景的预混液方案。
总结
Thermo赛默飞乾坤白金SYBR Green预混液以优化的热启动DNA聚合酶体系、SYBRGreenI荧光染料的高灵敏度检测能力以及ROX参比染料校正功能,为常规基因表达定量、病原体检测及SNP基因分型等实时荧光定量PCR应用提供了高性价比的国产化预混液选择。2×即用型浓度配方有效减少了多组分分液操作的移液误差,含ROX与不含ROX的双版本配置适配主流qPCR仪器平台。标准化的qPCR配制流程与规范的引物设计与熔解曲线分析,将有助于在日常高通量定量检测中维持结果的稳定性和可追溯性。