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产品型号:IPVH00010
更新时间:2026-04-20
厂商性质:经销商
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MilliporePVDF膜现货0.45μm
在蛋白质免疫印迹与免疫检测实验中,转印膜的选择直接决定了蛋白捕获效率、背景信号质量及实验的重现性。IPVH00010默克PVDF膜作为MerckMilliporeImmobilon®-P系列的明星产品,采用0.45µm孔径疏水性聚偏氟乙烯基质,为科研人员提供了适合大多数常规蛋白印迹应用的高性能转印载体。其高达215µg/cm²的BSA结合量与优异的物理机械强度,使其在Westernblotting、蛋白质测序及免疫检测等常规分子检测中表现出稳定可靠的性能。
选择IPVH00010默克PVDF膜,意味着为您的蛋白质印迹实验选择了一份经过全球数万篇文献验证的高性能转印平台。
一、产品核心优势解析
IPVH00010默克PVDF膜的设计聚焦于常规蛋白印迹中的核心需求:如何确保大多数分子量蛋白的高效转印与稳定结合,以及如何提高实验操作的便捷性与结果可重复性。
0.45µm精准孔径:适配大多数常规蛋白印迹应用
IPVH00010默克PVDF膜的核心技术参数在于其0.45µm的微孔直径。这一孔径规格是Westernblotting领域应用最为广泛的经典选择,尤其适用于分子量大于20kDa的蛋白质印迹。0.45µm孔径提供了适宜的孔隙结构与内表面面积,既保证了凝胶中分离蛋白的高效转移,又提供了足够的结合表面积,确保目标蛋白在转印过程中被牢固捕获。对于常规细胞裂解液、组织匀浆及纯化蛋白样品中的常见靶标蛋白,0.45µm孔径膜能够提供稳定可靠的结合性能。
出色的蛋白结合能力
IPVH00010默克PVDF膜通过静电和疏水双重吸附机制,实现了对不同类型蛋白质的高效结合。其技术参数显示:BSA吸附量达到215µg/cm²,山羊IgG吸附量达到294µg/cm²,胰岛素吸附量达到160µg/cm²。这一结合能力在PVDF膜产品中表现突出,能够有效保障靶标蛋白的捕获效率,尤其适用于需要检测低丰度表达靶标的实验场景。
物理性能与化学兼容性
与传统的硝酸纤维素膜相比,IPVH00010默克PVDF膜具有不错的物理性能。该膜在切割过程中不易破裂或卷曲,便于精准裁剪且不会碎裂,特别适合需要精确裁切和反复操作的复杂实验流程。
此外,该膜具备广泛的溶剂相容性以及优异的着色能力,可与氨基黑、胶体金、考马斯亮蓝、印度墨水、丽春红、Sypro®ruby等多种染料配合使用。当高浓度甲醇用于脱色时,PVDF转印膜不会发生降解、扭曲或收缩。更为重要的是,IPVH00010默克PVDF膜支持剥离抗体后重新进行杂交检测,对于需要优化抗体组合或检测多种靶蛋白的复杂实验方案,这一特性显著提高了实验的灵活性和成本效益。
快速免疫检测方案:节省实验时间
Merck推出的快速免疫检测实验方法,使用IPVH00010默克PVDF膜可以省去蛋白质印迹中的封闭步骤,并将洗涤时间从3次×10分钟缩短至3次×5分钟,整体检测时间从4小时5分钟减少至2小时5分钟,节省约2小时而不降低灵敏度或特异性。这一优化方案显著提升了实验室的工作效率,尤其适合高通量筛选和日常质控场景。
二、核心参数与规格
IPVH00010默克PVDF膜的主要技术参数如下:
参数类别具体规格
产品货号IPVH00010
品牌系列MerckMilliporeImmobilon®-P
滤膜材质疏水性聚偏氟乙烯(PVDF)
孔径0.45µm
尺寸26.5cm×3.75m(卷装)
滤膜颜色白色,光面
可湿润性疏水
BSA吸附量215µg/cm²
山羊IgG吸附量294µg/cm²
胰岛素吸附量160µg/cm²
主要吸附机制静电、疏水
应用范围Westernblotting、免疫印迹、吸附分析、氨基酸分析、N端蛋白质测序、Dot/Slotblotting、糖蛋白显色、脂多糖分析
检测方法化学发光法、放射检测法、显色法、荧光法、化学荧光法
兼容染色剂考马斯亮蓝、酰胺黑、印度墨水、丽春红、胶体金、CPTS、甲苯胺蓝、Sypro®ruby
可重复检测支持多次再生检测
储存条件室温干燥避光保存
市场参考价约4,551元/卷(26.5cm×3.75m)
三、适用场景与用户价值
IPVH00010默克PVDF膜适用于多个蛋白质检测领域,尤其在分子量大于20kDa的常规蛋白印迹应用中展现出核心价值。
蛋白质免疫印迹(Westernblotting)
IPVH00010默克PVDF膜是Westernblotting领域转印载体之一,尤其适合大多数常规蛋白质印迹应用,特别是分子量大于20kDa的蛋白质。在肿瘤标志物检测、信号通路蛋白分析、蛋白质表达水平比较等常规研究中,该膜能够提供稳定可靠的蛋白结合性能和低背景信号表现。
N端蛋白质测序与氨基酸分析
IPVH00010默克PVDF膜具有较高的蛋白质吸附率和测序得率,0.45µm孔径与疏水表面相结合,使其特别适用于Edman降解法N端测序和氨基酸组成分析。在这些应用中,目标蛋白需要被牢固吸附在膜表面以耐受多轮化学反应,IPVH00010默克PVDF膜的稳定结合特性能够有效满足这一要求。
Dot/Slotblotting与免疫检测
该膜适用于Dot/Slotblotting、免疫检测等点结合分析实验。其均匀的孔隙结构确保了样品在膜表面的均匀分布和稳定吸附,为半定量分析提供了可靠的基础。在快速免疫检测方案中,IPVH00010默克PVDF膜可省去封闭步骤,显著缩短检测周期。
糖蛋白显色与脂多糖分析
IPVH00010默克PVDF膜还可用于糖蛋白显色和脂多糖分析等特殊应用,其广泛的化学兼容性使其能够耐受多种染色和检测试剂。
大规模转印与高通量实验
IPVH00010默克PVDF膜采用26.5cm×3.75m卷装设计,可同时处理多块凝胶,适配高通量Westernblot实验。卷装可按需裁剪,支持多组平行实验,适合科研机构的批量研究以及高校分子生物学实验教学。此外,Merck还提供采用按规格裁切的印迹方片膜和两层过滤纸组成的印迹三明治,方便用户根据实验规模灵活选用。
四、使用操作指南
为了充分发挥IPVH00010默克PVDF膜的性能,以下操作建议可供参考。
甲醇预处理(膜活化)
IPVH00010默克PVDF膜具有疏水性,在直接接触水相缓冲液前,必须用甲醇进行预处理以活化膜表面。用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。
操作步骤:
将膜裁剪至所需尺寸
放入100%甲醇中浸泡15-30秒,直至膜体由不透明变为半透明状
将膜取出,转移至转移缓冲液中平衡5-10分钟
即可用于转印操作
转印条件建议
恒流转移:推荐电流密度为1-2mA/cm²
转膜时间:标准转印时间为60-90分钟,具体根据蛋白大小和凝胶厚度调整
缓冲液:常规Tris-甘氨酸转移缓冲液即可使用
电压:湿转推荐80-100V,半干转推荐根据设备说明操作
小分子量蛋白转印优化
对于分子量接近20kDa的蛋白,为增强结合效率,可在阳极缓冲液中加入20-30%甲醇,并适当减小施加的电流,避免小蛋白过快穿膜。过高的电压会导致小蛋白快速穿透膜体,采用湿转方式并适当延长转印时间,有助于小分子蛋白被充分捕获。
高分子量蛋白转印建议
对于高分子量蛋白质(>100kDa),可以延长转移时间至90-120分钟,并在转移缓冲液中加入0.01-0.04%SDS以改善洗脱效率,确保大分子量蛋白从凝胶中充分转移至膜上。
干燥保存与再水化
如果蛋白质转移至IPVH00010默克PVDF膜后不立即染色操作,可以干燥保存而不会影响后续检测。具体操作:将膜放在滤纸上,在室温下干燥1-2小时,然后用保鲜膜覆盖,并保存在阴凉、黑暗的地方。
在继续染色或检测之前,将膜置于100%甲醇中重新湿润,用水洗涤,然后在用于染色的溶剂中平衡即可。
重复检测(Stripandreprobe)
IPVH00010默克PVDF膜支持多次再生检测。完成一次免疫检测后,可通过Strip缓冲液去除结合的抗体,再次进行杂交检测。这一特性对于需要优化抗体组合或检测多种靶蛋白的复杂实验方案尤为重要。
五、操作注意事项
操作时请佩戴手套,避免手上蛋白污染膜面
使用干净平头镊子夹取IPVH00010默克PVDF膜,防止划伤或折痕
转印后需及时进行后续杂交或储存操作,避免膜面干燥影响结合
如需与快速免疫检测方案配合使用,请参考产品说明书中的优化流程
六、常见问题与解决建议
在IPVH00010默克PVDF膜的使用过程中,如遇以下问题可参考对应建议:
常见问题可能原因解决建议
背景过高封闭不充分或抗体浓度过高延长封闭时间(室温1-2小时或4℃过夜),优化一抗/二抗稀释比例
信号较弱转印效率低或抗体效价不足检查转膜条件(电流、时间),增加抗体浓度或延长孵育时间
膜无法浸润缓冲液甲醇活化不充分确保在100%甲醇中浸泡至膜体半透明后再进行缓冲液平衡
膜面出现气泡操作过程中混入空气操作前用缓冲液充分浸润,转印时用滚轮排除气泡
大分子蛋白转印转膜时间不足或SDS含量偏低增加电压或转膜时间,在转膜缓冲液中加入0.01-0.04%SDS
膜在切割时碎裂机械操作力度过大或膜过于干燥PVDF膜机械强度优于NC膜,正常操作下不易碎裂,建议使用干净锋利工具切割
与ISEQ00010的选型对比
在默克ImmobilonPVDF膜产品线中,IPVH00010(0.45µm)与ISEQ00010(0.2µm)是两款互补的经典产品,用户可根据目标蛋白分子量选择合适的孔径。
对比维度IPVH00010(0.45µm)ISEQ00010(0.2µm)
孔径0.45µm0.2µm
目标分子量蛋白质>20kDa蛋白质<20kDa
BSA吸附量215µg/cm²340µg/cm²
胰岛素吸附量160µg/cm²262µg/cm²
主要应用大多数常规免疫印迹低分子量蛋白印迹、蛋白质测序
推荐场景常规Westernblot、免疫检测小分子蛋白(如细胞因子、组蛋白)检测
防止蛋白渗漏常规结合能力专为防止小分子蛋白渗漏优化
选择建议:对于分子量大于20kDa的常规蛋白印迹应用,IPVH00010默克PVDF膜是高效且经济的优选方案;对于小于20kDa的小分子蛋白或N端蛋白质测序等高灵敏度需求场景,ISEQ00010默克PVDF膜则是更佳选择。
七、选型参考与采购信息
在选择IPVH00010默克PVDF膜时,可参考以下因素:
决策维度推荐选择核心考量
目标蛋白大小分子量>20kDa→IPVH00010(0.45µm);<20kDa→ISEQ00010(0.2µm)根据目标分子量选择合适的孔径
应用类型常规Westernblot、免疫印迹→IPVH00010该膜是大多数免疫印迹的理想选择
通量需求高通量、批量实验→26.5cm×3.75m卷装可按需裁剪,适应多种凝胶尺寸
检测方法化学发光、显色、荧光、放射性检测→兼容检测方式灵活,适配范围广
重复使用需求需要膜再生(stripandreprobe)→PVDF膜PVDF膜支持剥离抗体后重复杂交检测
时间效率需求追求快速检测→配合Merck快速免疫检测方案可省去封闭步骤,节省约2小时
总结
综上所述,IPVH00010默克PVDF膜以其0.45µm精准孔径、215µg/cm²的BSA高结合力以及26.5cm×3.75m的大尺寸卷装设计,成为常规Westernblot、免疫印迹和蛋白质测序等蛋白质检测实验中的可靠载体。其出色的物理强度、广泛的化学兼容性以及支持重复检测的灵活特性,使其在大多数蛋白质印迹应用中具有显著的实用价值。无论是常规蛋白的日常检测,还是高通量筛选的批量实验,这款产品都能为您的蛋白质分析工作提供稳定高效的转印支持。根据您的目标蛋白分子量和实验通量选择合适的规格,并遵循规范的预处理和转印流程,将有助于获得清晰、低背景的印迹结果。
MilliporePVDF膜现货0.45μm,杭州仟诺生物仓库全国直发。