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更新时间:2026-04-20
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ISEQ00010默克PVDF膜现货0.22µm
在蛋白质免疫印迹与蛋白质测序实验中,小分子量蛋白的信号强度往往容易被忽视,其转印效率更是决定结果成败的关键。ISEQ00010默克PVDF膜作为MerckMilliporeImmobilon®-PSQ系列的经典产品,采用0.2µm微孔聚偏氟乙烯(PVDF)基质,以高达340µg/cm²的BSA吸附量,为科研人员提供了低背景、高灵敏度的转印支持。其26.5cmx3.75m的大尺寸卷装设计便于按需裁剪,专用于小于20kDa蛋白质的低分子量Westernblotting、氨基酸分析以及N端蛋白质测序,有效防止小分子蛋白在转印过程中的渗漏问题。
选择ISEQ00010默克PVDF膜,意味着为您的低分子量蛋白检测工作选择了一份经过全球实验室验证的高捕获率转印载体。
一、产品核心优势解析
ISEQ00010默克PVDF膜的设计聚焦于低分子量蛋白转印中的核心挑战:如何在保持高吸附率的同时防止小分子量蛋白的渗漏,以及如何提高小分子量蛋白在测序中的得率。
0.2µm精确孔径与大的内表面面积
ISEQ00010默克PVDF膜的核心技术参数在于其0.2µm的微孔直径。相较于0.45µm的标准PVDF膜,0.2µm的孔径更小、内比表面积更大,能够有效降低膜渗漏,尤其适合分子量小于20,000的蛋白质的印迹。
这一特性使其在捕获低分子量蛋白方面具备明显优势,即使对于分子量极低的小肽段也能实现高效结合,避免了目标蛋白直接穿透膜体而造成的信号丢失。
超高蛋白结合能力
ISEQ00010默克PVDF膜通过静电和疏水双重吸附机制,实现了对不同类型蛋白质的稳定结合。其技术参数显示:BSA吸附量高达340µg/cm²,胰岛素吸附量达262µg/cm²,山羊IgG吸附量更是达到了448µg/cm²。
对于胰岛素等小分子量蛋白,其结合量甚至达到了较高的数值,这一特性使得该膜在处理裂解物或难水解蛋白时,仍能保持较高的捕获效率,有效保障低丰度靶标的检测灵敏度。
防止渗漏:保护小分子量蛋白的完整性
在常规Westernblot实验中,小于20kDa的蛋白质极易在转印过程中“穿膜而过",导致膜上无信号或信号极弱。ISEQ00010默克PVDF膜凭借0.2µm的精密孔径和大内表面面积,能够有效阻截这些极易渗透的小分子蛋白,确保其被牢固地捕获在膜上,为后续的抗体孵育和检测提供了坚实基础。
实际转印测试结果表明,采用常规PVDF膜时会有部分低分子量蛋白透过,而在主膜之后放置一片ISEQ00010默克PVDF膜作为捕获层,可有效捕捉穿透的小分子蛋白,验证了其防止渗漏的性能。
物理性能与化学兼容性
与传统的硝酸纤维素膜相比,ISEQ00010默克PVDF膜具有更优的物理性能。该膜不易破裂或卷曲,便于裁剪且在切割过程中不会碎裂,非常适合需要精确裁剪和反复操作的复杂实验流程。
此外,其具备广泛的溶剂相容性以及优异的着色能力,可以重复检测(Strippingandreprobing),对于需要优化抗体组合或检测多种靶蛋白的复杂实验方案尤为重要。
二、核心参数与规格
ISEQ00010默克PVDF膜的主要技术参数如下:
参数类别具体规格
产品货号ISEQ00010
品牌系列MerckMilliporeImmobilon®-PSQ
滤膜材质疏水性聚偏氟乙烯(PVDF)
孔径0.2µm
尺寸26.5cm×3.75m(卷装)
滤膜颜色白色,光面
可润湿性疏水
BSA吸附量340µg/cm²
胰岛素吸附量262µg/cm²
山羊IgG吸附量448µg/cm²
主要吸附机制静电、疏水
应用范围低分子量Westernblotting、氨基酸分析、N端蛋白质测序、Dot/Slotblotting
检测方法化学发光法、放射检测法、显色法、荧光法
兼容染色剂考马斯亮蓝、丽春红、印度墨水、酰胺黑、胶体金、Sypro®ruby等
储存条件室温干燥避光保存
三、适用场景与用户价值
ISEQ00010默克PVDF膜适用于多个分子检测领域,尤其在小分子量蛋白研究中展现出核心价值。
低分子量Westernblotting(<20kDa)
ISEQ00010默克PVDF膜专为低分子量蛋白质的印迹检测而设计。在神经科学、细胞因子研究、小分子肽段检测等场景中,传统0.45µm膜常常因为孔径过大导致小分子量蛋白穿膜而过,而ISEQ00010默克PVDF膜凭借0.2µm的精确孔径和大内表面面积,能够有效防止此类渗漏现象,确保低丰度的小分子靶标被充分捕获,提高检测灵敏度。
对于分子量小于20,000的蛋白质,尤其是胰岛素、组蛋白、细胞因子及小分子量裂解物或难水解蛋白,ISEQ00010默克PVDF膜是印迹实验的理想选择,可获得更高的测序得率。
N端蛋白质测序与氨基酸分析
由于ISEQ00010默克PVDF膜具有较高的蛋白质吸附率和测序得率,0.2µm孔径与大的内表面面积相结合,使其特别适用于Edman降解法N端测序。在该应用中,目标蛋白需要被牢固吸附在膜表面以耐受多轮化学反应,ISEQ00010默克PVDF膜的稳定结合特性能够有效满足这一要求。
免疫检测与蛋白点结合
ISEQ00010默克PVDF膜适用于WesternBlotting、Immunoblotting和Dot/SlotBlotting。其疏水性膜体在经甲醇活化后,能够通过疏水作用牢固吸附蛋白,背景低、着色容易,结果清晰。
大规模转印与高通量实验
ISEQ00010默克PVDF膜采用26.5cm×3.75m卷装设计,可同时处理多块凝胶,适配高通量Westernblot实验。卷装可按需裁剪,支持多组平行实验,适合科研机构的批量研究以及高校分子生物学教学实验。此外,Merck还提供采用按规格裁切的印迹方片膜和两层过滤纸组成的印迹三明治,方便用户根据实验规模灵活选用。
四、使用操作指南
为了充分发挥ISEQ00010默克PVDF膜的性能,以下操作建议可供参考。
甲醇预处理(膜活化)
ISEQ00010默克PVDF膜具有疏水性,在直接接触水相缓冲液前,必须用甲醇进行预处理以活化膜表面。操作步骤:将膜裁剪至所需尺寸,放入100%甲醇中浸泡15-30秒,直至膜体由不透明变为半透明状;将膜取出,转移至转移缓冲液中平衡5-10分钟,即可用于转印。
小分子量蛋白转印优化
为增强低分子量蛋白质(<20kDa)的结合效率,可在阳极缓冲液中加入20-30%的甲醇,并减小施加的电流。过高的电压会导致小蛋白快速穿膜,采用湿转方式并适当延长转印时间,有助于小分子蛋白被充分捕获。
高分子量蛋白转印建议
对于高分子量蛋白质,可以延长转移时间,并在转移缓冲液中加入低浓度的十二烷基Na2SO3(<0.01%w/v)以改善洗脱效率,确保大分子量蛋白从凝胶中充分转移至膜上。
干燥保存与再水化
如果蛋白质转移至ISEQ00010默克PVDF膜后不立即染色操作,可以干燥保存而不会影响试验。具体操作:将膜放在滤纸上,在室温下干燥1-2小时,然后用保鲜膜覆盖,并保存在阴凉、黑暗的地方。
在继续染色/脱色和测序之前,可以使用以下方法之一重新湿膜:(1)将膜置于100%甲醇中,用水洗涤,然后在用于染色的溶剂中平衡;(2)直接将膜放入至少含有50%甲醇的染色液中。
五、操作注意事项
操作时请佩戴手套,避免手上蛋白污染膜面
使用干净平头镊子夹取ISEQ00010默克PVDF膜,防止划伤或折痕
该膜支持多次重复检测,可在完成一次免疫检测后,通过Strip缓冲液去除抗体后再次杂交
常见问题与解决建议
在ISEQ00010默克PVDF膜的使用过程中,如遇以下问题可参考对应建议:
常见问题可能原因解决建议
背景过高封闭不充分或抗体浓度过高延长封闭时间(室温1-2小时或4℃过夜),优化一抗/二抗稀释比例
小分子蛋白信号弱转印条件不当或小蛋白穿膜在阳极缓冲液中加入20-30%甲醇,减小电流,适当延长转印时间
大分子蛋白转印转膜时间不足或SDS含量偏低增加电压或转膜时间,在转膜缓冲液中加入0.01-0.04%SDS
膜无法浸润缓冲液甲醇活化不充分确保在100%甲醇中浸泡至膜体半透明后再进行缓冲液平衡
膜面出现气泡操作过程中混入空气操作前用缓冲液充分浸润,转印时用滚轮排除气泡
六、选型参考与采购信息
在选择ISEQ00010默克PVDF膜时,可参考以下因素:
决策维度推荐选择核心考量
目标蛋白大小分子量<20kDa蛋白→ISEQ00010(0.2µm);>20kDa蛋白→IPVH00010(0.45µm)根据目标分子量选择合适孔径,避免小蛋白穿膜
应用类型低分子量WB、N端测序、氨基酸分析→ISEQ00010该膜专为小蛋白和测序场景优化
通量需求高通量、批量实验→26.5cm×3.75m卷装可按需裁剪,适应多种凝胶尺寸
检测方法化学发光、显色、荧光、放射性检测→兼容检测方式灵活,适配范围广
重复使用需求需要膜再生(stripandreprobe)→PVDF膜PVDF膜支持剥离抗体后重复杂交检测
总结
综上所述,ISEQ00010默克PVDF膜以其0.2µm精准孔径、高达340µg/cm²的BSA结合力以及26.5cm×3.75m的大尺寸卷装设计,成为低分子量Westernblot、N端蛋白质测序和氨基酸分析等分子检测实验中的可靠载体。无论是小分子量蛋白的精准捕获,还是需要高蛋白吸附率的蛋白质测序应用,这款产品都能为您的印迹检测工作提供稳定高效的转印支持。根据您的样品类型和检测方法选择合适的孔径与规格,并遵循规范的预处理和转印流程,将有助于获得清晰、低背景的印迹结果。
ISEQ00010默克PVDF膜现货0.22µm,杭州仟诺生物仓库现货全国直发。