细胞RNA提取Trizol试剂100/200ml

细胞RNA提取Trizol试剂100/200ml

    当您打开一瓶清澈的细胞RNA提取Trizol试剂，它不仅仅是溶液，更是稳定RNA分子、解锁高质量转录组数据的起点。

    在分子生物学研究中，获得完整且无降解的RNA是基因表达分析、转录组测序等下游实验成功的基础。细胞RNA提取Trizol（通常指基于酸性苯酚-异硫氰酸胍的裂解液）作为一种经典且高效的一步法提取试剂，通过其独特的化学配方，能同时裂解细胞、抑制RNase并分离RNA，已成为众多实验室进行细胞RNA提取Trizol法操作的。

一、核心原理：为何选择Trizol法？

    细胞RNA提取Trizol试剂的核心优势在于其“一步法"裂解与分离原理。试剂中的主要成分协同工作：

    异硫氰酸胍：是一种蛋白质变性剂，能迅速溶解细胞并灭活细胞内的核糖核酸酶（RNases），这是保护RNA不被降解的关键。

    苯酚：在酸性条件下，苯酚促使细胞裂解液发生相分离。在此环境中，RNA选择性地位于上层水相，DNA位于中间界面，而蛋白质和细胞碎片则位于下层有机相或被沉淀。

    辅助成分：如乙酸钠、β-巯基乙醇等，进一步稳定环境，辅助RNA沉淀。

    这种设计使得从细胞RNA提取Trizol开始，到获得纯化RNA的整个过程可以在一个小时内完成，并且能有效从少量样品（如10^5个细胞）中分离出总RNA、mRNA和小RNA。

二、产品关键规格与参数

    一瓶标准的细胞RNA提取Trizol试剂具有明确的理化规格，确保批次间的一致性和实验的可重复性。

    参数类别典型规格说明

    外观与性状清澈、淡红色至粉红色均一液体。颜色因pH指示剂存在所致，不影响功能。

    主要组成包含苯酚、异硫氰酸胍、乙酸钠、甘油等。配方为酸性pH环境（通常<4.5）。

    包装规格常见包装为100mL、200mL和1L的棕色玻璃瓶或耐化学腐蚀的塑料瓶，避光保存。

    储存条件建议在2-8°C下避光储存。在正确条件下，有效期通常可达1-2年。开封后应注意密封，防止氧化和挥发。

    安全信息含苯酚和异硫氰酸胍，具有毒性和腐蚀性。操作时必须在通风橱中进行，并佩戴手套、护目镜和实验服。

    性能指标提取的RNAA260/A280比值通常在1.8-2.0之间，表明纯度良好；A260/A230比值应大于2.0，表明无机盐和有机溶剂残留低。

三、标准操作流程概述

    使用细胞RNA提取Trizol进行RNA提取遵循一个经典流程，熟练后可高效完成：

    样品均质化：将细胞或组织在细胞RNA提取Trizol试剂中充分裂解。

    相分离：加入氯仿，剧烈振荡后离心，溶液分为水相、界面和有机相。

    RNA沉淀：小心吸取上清（含RNA的水相），加入异丙醇沉淀RNA。

    RNA清洗：用75%乙醇洗涤沉淀，去除残留盐分。

    RNA溶解：干燥后，用无RNase的水或缓冲液溶解RNA沉淀。

    整个细胞RNA提取Trizol流程的关键在于操作迅速、防止RNase污染，并在低温下进行以维持RNA完整性。

四、应用领域与下游实验兼容性

    通过细胞RNA提取Trizol法获得的RNA纯度高、完整性好，适用于多种对输入物料要求严苛的下游应用：

    实时荧光定量PCR：用于基因表达的精确定量分析。

    转录组测序：作为RNA-Seq的起始材料，用于全转录组研究。

    NorthernBlot：用于检测特定RNA分子的表达与大小。

    cDNA文库构建：用于克隆和表达研究。

总结

    细胞RNA提取Trizol试剂100/200ml以其可靠、高效的特性，数十年来一直是分子生物学实验室的基石。理解其原理并规范操作，是确保从细胞中成功捕获“真实"转录组信息的首要步骤。尽管后续出现了许多基于硅胶柱的纯化试剂盒，但细胞RNA提取Trizol法在成本效益、通量灵活性以及对复杂样品的处理能力上，依然保持着不可替代的地位。