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产品名称:

Hs578T人乳腺癌细胞

产品型号: 产品时间: 2018-12-12
Hs578T人乳腺癌细胞
该细胞公司*,培养状态下的,现货一周供应,我公司可100%保障该细胞的质量,代数年轻活性好,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体 。

产品概述

Hs578T人乳腺癌细胞

【细胞生长】:贴壁生长,在软琼脂中成簇生长,并可悬浮生长

【细胞传代】:1:3 传代

【细胞活力】:90%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

【细胞检测】:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

【细胞冻存】:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)

【细胞运输】:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)

【细胞用途】:人乳腺管癌细胞价格只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗

关于细胞培养温馨小贴士
细胞的冻存方法
1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。

2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。

3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。

4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。

5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。


 培养基生产和使用常见问题
1.低血清培养基能用肉眼判断其pH值吗?
   答:低血清培养基中酚红的含量与普通培养基中的酚红含量不同,不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值,建议使用pH计进行测定。
2.低血清培养基的缓冲系统是什么?
   答:平衡盐一般是由无机盐及葡萄糖组成的。平衡盐有Hanks′系统、Earle′s系统、Dulbecco′s磷酸缓冲盐系统等。199系列培养基、MEM系列培养基均有Hanks′系统的培养基及Earle′s系统的培养基。但是有些培养基均不是以上常规的平衡盐系统,例如RPMI 1640培养基、F12培养基。MEM(SLM)低血清培养基的平衡盐系统也不是常规的平衡盐系统,该平衡盐系统的缓冲能力强于常规平衡盐系统的缓冲能力。
3.谷氨酰胺溶液和碳酸氢钠的配制方法是什么?
   答:以0.2mol/L的 L-谷氨酰胺配制为例:称取L-谷氨酰胺2.92g,加注射用水100ml,充分搅拌混匀。用0.2μm滤膜正压过滤除菌。溶液应在4℃下避光保存,2周内使用。以7.5% NaHCO3的配制为例:称取NaHCO37.5g溶于100ml蒸馏水中过滤除菌。
4.什么培养基中可以省去加酚红?
   答:酚红在培养基中用作pH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响,可以通过纯化技术去除,但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长,当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分,很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。
5.放置在冰箱中的培养基颜色会发生变化,为什么?
 
     答:培养基保存于4℃冰箱中,培养基内CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而培养基中酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱后再用于细胞培养将造成细胞生长停滞或死亡。培养基偏碱时,可以通入无菌过滤的CO2,以调整pH值。
6.无血清培养与有血清培养使用的抗生素量一样吗?
    答:当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。因为血清中的蛋白会结合和灭活一些抗生素。而在无血清培养条件下,抗生素不被灭活。
7.培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?
    答:一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
8.什么是个性化培养基?它有什么优点?
    答:根据细胞类型、培养方式和生产工艺等特点所定制的培养基,即个性化培养基。个性化培养基在国外生物制药企业被普遍采用,个性化培养基可以为细胞生长提供充足的营养物质,能提高细胞的生长速率、培养密度、以及延长细胞维持时间;也可以为细胞生长提供均衡的营养供给,减少细胞有害代谢物质的积累,降低对细胞生长的危害;同时对贴壁细胞而言,能增加细胞的贴壁性,并降低培养过程中剪切力对细胞的损伤;个性化培养基可以根据各户的特殊需求减少或不使用动物源成分,从而使生物制品安全性更有保障。
9.细胞培养基偶然被冻,可否继续使用?
    答:如果细胞培养基偶然被冻,您应该自然溶解培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生,培养基可以正常使用,如果出现沉淀,只能丢弃这些培养基。
10.细胞冷冻培养基之成份为何?
    答:动物细胞冷冻保存时最常使用的冷冻培养基是含5 - 10%DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95%原来细胞生长用的新鲜培养基均匀混合。注意:由于DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成。
11.培养基及其它添加物和试剂可反复冻融吗?
    答:大部分添加物和试剂最多可以冻融3次,如果次数过多会将使含有的蛋发生降解和沉淀,这将会影响它的性能。
12.液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?
    答:要冷藏!!通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月到一年。

Hs578T人乳腺癌细胞
贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜*培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养

贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存

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