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更新时间:2026-10-14
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伯乐CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪
在基因表达分析、病原体核酸检测及SNP基因分型等分子生物学研究中,qPCR系统的荧光通道数、温控均一性与操作便捷性直接决定了检测数据的可信度与实验室的运行效率。面对需要同时检测多个靶标的复杂实验、对温度优化要求较高的引物筛选流程,以及多用户共享的设备使用场景,一台兼具六通道光学检测能力、精准温度梯度功能与灵活连接方式的实时荧光定量PCR仪,已成为现代分子实验室的核心设备。
伯乐CFXOpus96实时荧光定量PCR仪(货号12011319)作为Bio-RadCFX系列的新一代机型,以6通道光学检测系统、1–24°C可编程温度梯度以及Wi-Fi/以太网/USB多模式连接与BR.io云平台支持,为基因表达分析、核酸定量、基因突变检测及GMO检测等应用提供了兼具性能深度与操作灵活性的标准化平台。该仪器可在无需外接电脑的情况下独立完成实验设置与运行监控,并支持每孔多达5个目标基因的同时检测。
一、核心技术参数与术语解析
CFXOpus96(货号12011319)在光学系统、温控模块和连接能力三个维度均达到了较高的性能标准。
1.1核心技术参数
参数类别具体规格
产品货号12011319
样品容量96×0.2mL
反应体系1–50μL(推荐10–50μL)
检测通道数6个(5色+FRET专用通道)
激发光源6个带滤光片的LED,每个通道独立光源
检测器6个带滤光片的光敏二极管
激发/发射波长范围450–730nm
多重检测能力每孔5个目标基因
灵敏度可检测人类基因组单拷贝基因
动态范围10个数量级
扫描时间全通道12秒,单通道快速扫描3秒
温控范围0–100°C
最大升降温速率5°C/秒;平均3.3°C/秒
温度准确性±0.2°C(@90°C)
温度均一性±0.3°C(孔间,到达90°C后10秒内)
温度梯度功能有
梯度工作范围30–100°C
可编程梯度差范围1–24°C
热盖温度30–110°C
外形尺寸(W×D×H)33×56×36cm
重量22kg
连接方式Wi-Fi、以太网、USB、BR.io云平台
是否支持中文操作支持
支持染料TaqMan、MolecularBeacon、FRET探针、SYBRGreenI等
1.2行业术语词典
光学反应模块(OpticalReactionModule):集成光学激发与检测系统的可互换模块,插入C1000Touch热循环仪底座后即可将普通PCR仪升级为实时荧光定量PCR系统,无需更换整台仪器。
温度梯度功能(ThermalGradient):在同一加热块上建立从低温到高温的连续温度梯度,允许在同一次运行中同时测试多个退火温度条件,用于快速优化PCR反应体系。
多重检测能力(Multiplexing):在同一反应孔中同时检测多个靶标基因的能力,通过不同荧光染料的激发和发射波长区分各个靶标。CFXOpus96支持每孔5个靶标的同时检测。
HRM(高分辨率熔解曲线):基于双链DNA熔解温度差异进行基因分型和突变扫描的分析方法,可用于SNP检测、甲基化分析和物种鉴定。
Shuttle光学系统:CFXOpus系列采用的光学检测架构,确保在整个样品板上获得一致的荧光测量结果。
二、核心技术优势
2.1六通道光学系统与五重检测能力
CFXOpus96的光学检测模块配备6个带滤光片的LED作为激发光源和6个带滤光片的光敏二极管作为检测器,波长覆盖450–730nm。这一配置支持每孔多达5个目标基因的同时检测,外加一个专用的FRET单重检测通道。每个通道配备独立光源的设计确保了各荧光通道的激发效率和检测灵敏度。
在灵敏度方面,该仪器可检测人类基因组DNA中的单拷贝目标序列,动态范围达10个数量级。所有通道的扫描时间仅需12秒,单通道快速扫描仅需3秒,在批量样本处理中显著提升了运行效率。
2.2温度梯度功能:一次实验完成条件优化
CFXOpus96的温度梯度功能是其区别于基础qPCR仪的核心优势之一。梯度工作范围为30–100°C,可编程梯度差范围为1–24°C。研究人员可在同一次运行中对不同列设置不同的退火温度,快速确定每个引物对的最佳扩增条件。温度均一性达到±0.3°C(孔间),确保不同列之间的温度条件准确可控。
这一功能在需要同时优化多个引物对的实验中尤为高效——在多重PCR体系建立、新引物验证以及不同靶标共扩增的退火温度兼容性测试中,温度梯度功能可将多轮优化实验压缩为单次运行。
2.3灵活连接与云平台支持
CFXOpus96在连接方式上提供了Wi-Fi、以太网和USB三种选择,并支持BR.io云平台远程操作和网络存储驱动器访问,便于多用户共享平台的数据管理和跨设备协作。用户可在不连接电脑的情况下通过云平台完成运行监控和数据分析。仪器还支持桌面版CFXMaestro软件进行本地数据管理。
2.4数据分析与文献发表支持
配套的CFXMaestro™软件支持多种分析模式,包括基于标准曲线的绝对定量、相对标准曲线、基于比较Ct值的相对定量、熔解曲线分析、基因分型以及HRM分析。软件支持MIQE注释,帮助研究人员满足实时荧光定量PCR实验发表的信息标准。
三、核心应用场景
3.1基因表达分析
CFXOpus96广泛应用于基因表达水平分析。在发表于ScientificReports的腹主动脉瘤研究中,研究人员使用CFXOpus96进行qPCR实验,每反应使用3ngcDNA,以HPRT1、TBP为内参基因,通过TaqMan™基因表达检测试剂盒对ACTA2、MMP9等靶标进行定量分析。
在一项紫花苜蓿花粉发育的研究中,研究人员使用CFXOpus96结合SYBRGreen实时PCR预混液进行qRT-PCR,以β-actin作为参考基因,分析MsMYB35转录因子在不同组织中的表达水平。
3.2病原体检测与分子诊断
在病原体核酸检测中,CFXOpus96的六通道光学系统支持多重病原体的同步筛查。在一项结核分枝杆菌核酸检测的性能评估研究中,CFXOpus96Dx实时荧光PCR分析仪检测MTBDNA的检测限(LOD)符合试剂说明书要求的1×10²个菌/ml,批内变异系数(CV)表现良好。
在意大利北部水蛇种群的眼菌病流行病学研究中,研究人员使用CFXOpus96系统进行qPCR检测,靶向rRNA基因簇的基因间间隔区(IGS),实现了对病原体的灵敏检测。
3.3基因突变检测与SNP基因分型
借助高分辨率熔解曲线(HRM)功能,CFXOpus96可进行基因突变扫描和SNP基因分型。在需要区分微小熔解温度差异的突变检测中,±0.3°C的孔间温度均一性为HRM分析提供了稳定的温度基准。
3.4多重PCR与共扩增分析
CFXOpus96支持单重和多重qPCR反应。在已发表的Protocol中,研究人员使用CFXOpus96系统在20μL反应体积中进行单重qPCR(S-qPCR)和多重qPCR(M-qPCR)的对比分析。
四、使用与操作指南
4.1标准操作流程
第一步:开机与系统检查
将电源线插入接地、防浪涌的交流电源插座
按下仪器后方的电源开关启动系统
检查运输螺丝是否已取出,系统会自动识别并显示提示
第二步:实验方案创建
在触摸屏主界面选择“新建实验"或调用预存模板
设置温度程序:包括预变性、变性、退火/延伸、循环数等参数
选择荧光通道,设置数据采集步骤
如需条件优化,启用温度梯度功能并设置梯度范围(1–24°C)
第三步:反应体系配制与上机
使用0.2mL单管、八联管或96孔板配制反应体系
推荐反应体积为10–50μL
将反应板放入样品槽,关闭热盖
第四步:运行监控
在触摸屏或连接的电脑上实时监控扩增曲线
运行过程中可查看各通道荧光信号的变化
第五步:数据分析与导出
运行结束后,在触摸屏或CFXMaestro软件中进行数据分析
支持绝对定量、相对定量、熔解曲线分析、基因分型、HRM等多种分析模式
数据可通过USB接口导出,或上传至BR.io云平台
4.2实验室环境与管理要求
根据Bio-Rad仪器指南,CFXOpus96对实验室环境有明确要求:
摆放位置:仪器后方至少预留10cm,侧面或顶部至少预留5cm,以保证排气顺畅
环境温度:工作条件为15–31°C,湿度0–80%RH(无冷凝)
电源要求:需使用接地、防浪涌的交流电源插座,电源线额定电流需≥10安培
散热空间:仪器周边不要堆放试剂、纸箱,保障散热通风
4.3日常维护与故障排查
日常清洁:使用湿布或纸巾清洁仪器外表面,如有需要可使用温和皂液,然后用湿布擦拭干净。仪器内部温控模块和光学检测组件属于精密核心部件,厂家明确不允许普通用户自行拆解,私自拆解会造成光路偏移和计量校准失效。
周期性校准:建议每年或每半年由Bio-Rad工程师使用专业工具(如经校准的热电偶)进行一次全面的温度校准。染料校准可通过CFXMaestro软件的“校准向导"完成。
常见故障与处理:如遇荧光信号不稳定或光路报错,可能由光学模块部件故障或光路污染引起,需联系原厂售后进行光路校准,不可自行拆解维修。
五、常见问题解答
Q1:CFXOpus96与CFX96Touch的主要区别是什么?
CFXOpus96是Bio-RadCFX系列的新一代机型,在温度均一性(±0.3°Cvs±0.4°C)、连接方式(新增Wi-Fi和BR.io云平台支持)以及光学系统一致性方面进行了升级。
Q2:CFXOpus96的检测通道数是多少?
6个带滤光片的LED激发光源和6个带滤光片的光敏二极管检测器,支持每孔5个目标基因+1个FRET通道的检测配置。
Q3:温度梯度功能的范围是多少?
梯度工作范围为30–100°C,可编程梯度差范围为1–24°C。
Q4:支持哪些荧光染料?
支持TaqMan、MolecularBeacon、FRET探针、SYBRGreenI等多种常用荧光染料。检测通道覆盖FAM/SYBRGreen、HEX/VIC、TexasRed/ROX、Cy5、Cy5.5、Alexa750等。
Q5:是否支持中文操作界面?
支持。仪器触摸屏和CFXMaestro软件均支持中文操作。
Q6:反应体系推荐体积是多少?
推荐使用10–50μL的反应体系,仪器支持1–50μL的灵活反应体积范围。
总结
伯乐CFX Opus 96实时荧光定量PCR仪(货号12011319)以6通道光学检测系统、1–24°C温度梯度功能、Wi-Fi/以太网/USB多模式连接与BR.io云平台支持以及±0.3°C孔间温度均一性的核心配置,为基因表达分析、病原体检测、SNP基因分型及多重PCR共扩增等应用场景提供了高灵活性的实时荧光定量PCR解决方案。每孔5个目标基因的检测能力适配多重病原体筛查和复杂基因表达Panel,温度梯度功能将引物优化实验从多轮压缩为单次运行,灵活连接与云平台支持降低了多用户共享平台的数据管理门槛。根据您的实验通量、多重分析需求和预算条件选择合适的配置,并遵循规范的实验室环境管理和日常维护流程,将有助于在日常检测任务中维持扩增结果的稳定性和数据全周期的可追溯性。