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产品名称:

PC3人胰腺癌细胞

产品型号: 产品时间: 2024-05-27
PC3人胰腺癌细胞
细胞培养的基本原理与技术 现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。

产品概述

PC3人胰腺癌细胞

细胞特性

1)来源:胰腺癌

2)形态:上皮细胞样,贴壁生长

3)含量:>lxl06 个/mL

4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格:T25瓶或者lmL冻存管包装

运输和保存:使用T25瓶充液发送活细胞。收到细胞后,请先在显微镜下检查细 胞生长状态,并将T25瓶置于培养箱约6h或过夜后,再次检查细胞状态。若状 态良好,可进行细胞后续处理操作,按照以下方式进行。若发现可疑污染物,请 及时与我们取得联系。

细胞用途:仅供科研使用。

PC3人胰腺癌细胞

细胞培养步骤

1)培养基及培养冻存条件准备:

1.准备F-12K培养基(F-12K : GIBCO,货号:21127-022);北美胎牛血清,10%; PS 1%。

2.培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱 湿度为70%-80%。

3.冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

2)细胞处理:

1. 复苏细胞:将含有lmL细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻,加 入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补 加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入l〇cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检 查细胞密度。

2.细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37°C培

养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部 分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止 消化。

按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分 钟,弃去上清液,补加l-2mL培养液后吹匀。

将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者 瓶中。

3.细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例;

细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml胰酶,细 胞变圆脱落后,加入2ml*培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至终浓度为 10%。加入DMSO后迅速混匀,按每lml的数量分配到冻存管中,注意冻存 管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液 氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

 

注意事项:

收到细胞后,若发现干冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染, 请立即与我们联系。

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作, 并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

 

 

 

 

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