scc-25人舌鳞癌细胞

scc-25人舌鳞癌细胞

培养条件    90%DMEM（高糖）+10%FBS+1%双抗

温度    37℃

空气条件  5% CO2，,95% AIR

传代方法1:2传代，2~3天换液

冻存条件90%FBS+10%DMSO

根据细胞生长的特点，传代方法有3种：

（1）悬浮生长细胞传代

离心法传代：离心（1000转/分）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。

直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除1/2-2/3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。

（2）半悬浮生长细胞传代（HeIa细胞）

此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹。

打法使细胞从瓶壁脱落下来，进行传代。

（3）贴壁生长细胞传代

采用酶消化法传代，常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。xy-6437R    ANKRD53锚蛋白重复域53抗体

scc-25人舌鳞癌细胞

贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜*培养基，第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基，培养观察
3.若出现生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养

贴壁细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1.吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加适量0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间）
2.镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的*培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存