RKO人结肠癌细胞（低分化）

RKO人结肠癌细胞(低分化)

缩写:RKO

种属:Human/人

来源:ATCC

缩写:RKO

种属:Human/人

来源:ATCC

背景资料:RKO是一个低分化的结肠癌细胞系。RKO细胞含有野生型P53，但缺乏人甲状腺受体核受体(h-TRbeta1)。RKO细胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6细胞。RKO细胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的亲本细胞系。该细胞系在裸鼠中成瘤，且在软琼脂中形成集落。

生长特性:贴壁生长

培养条件:89%EMEM+10%FBS+1%双抗

规格:T25

细胞数:1x10^6 cells

细胞活力:.95

细胞检测:不含细菌、真菌、支原体污染。

传代方法:1:2—1:4

冻存条件:90%FBS+10%DMSO

悬浮细胞接收后的操作流程与注意事项
1.如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室 
2.拧松瓶盖，细胞瓶竖立培养8h（或过夜）
3.待细胞沉底后吸除上层液体（含碎片残渣，请小心操作），然后吸取沉底的细胞层（2ML左右转移到新的培养瓶，加入新鲜的*培养基（如细胞状态较差可将血清浓度调高到15%）继续培养
 
悬浮细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1.将培养瓶/皿中的细胞重悬混匀
2.吸取2/3或者一半混匀后的细胞悬液到新的培养瓶/皿
3.分别在原瓶/皿和新分瓶的培养瓶/皿加入等量或者2倍的新鲜培养基，使细胞密度保持在5 X10(5) /ml左右
4.注意培养基PH值变化情况和细胞密度，定期半量换液（每周2-3次），待细胞密度大于2 X 10(6) /ml以后重复1项操作或者冻存

RKO人结肠癌细胞(低分化)

贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜*培养基，第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态，请将悬浮的细胞即时离心，加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基，培养观察
3.若出现生长不均：贴壁细胞若出现分布不均，成岛状生长，可将细胞进行消化，重悬打散细胞，加入新鲜培养基进行培养

贴壁细胞常规培养传代流程（请严格遵照无菌操作）
1.吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加适量0.25%胰酶进行消化细胞（注意把握消化时间）
2.镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉胰酶，加6~8ml *培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的*培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存