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产品名称:

PH急性单核细胞白血病细胞

产品型号: 产品时间: 2018-12-14
PH急性单核细胞白血病细胞
该细胞公司*,培养状态下的,现货一周供应,我公司可100%保障该细胞的质量,代数年轻活性好,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体 。

产品概述

PH急性单核细胞白血病细胞

安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。

()如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量*培养基终止消化。

3. 6-8ml/瓶补加*培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二。

           注意事项:

1、观察细胞在低倍镜(45X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们。

PH急性单核细胞白血病细胞

贴壁细胞接收后的操作流程与注意事项
1.收到细胞当天尽快更换新鲜*培养基,第二天再进行消化处理
2.如果细胞收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的*培养基到新的培养皿/瓶继续培养观察。同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的*培养基,培养观察
3.若出现生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养

贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作
1.吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加适量0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间)
2.镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3.取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的*培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4.注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项作或者冻存

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