欢迎访问杭州仟诺生物科技有限公司网站!
销售咨询热线:
17758005454
您的位置: 网站首页 >> 产品中心 >> 细胞株 >> 人源细胞系 > IMR-90人胚肺成纤维细胞
产品名称:

IMR-90人胚肺成纤维细胞

产品型号: 产品时间: 2018-12-13
IMR-90人胚肺成纤维细胞
该细胞公司*,培养状态下的,现货一周供应,我公司可100%保障该细胞的质量,代数年轻活性好,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体 。

产品概述

IMR-90人胚肺成纤维细胞

【产品产地】ATCC
【细胞形式】冻存及复苏
【质量控制】本细胞经过了检测,不含有细菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原体。
【培养条件】37℃,5% CO2,PH值7.2~7.4,无菌恒温培养。
【研究范围】本产品只提供科研使用,不可应用于治疗等其他方面。
活力检测操作步骤:
1. 配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100mL,用滤纸过滤,4℃保存。使用时用PBS稀释至0.4%。
2. 胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释(106 cells/mL)。
3. 取少量细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合,轻轻吹打混匀,染色2~3min。
4. 显微镜下观察,死细胞着浅蓝色并膨大,无光泽;活细胞保持正常形态,无色透明有光泽。若需计算活细胞率则将染色的细胞悬液滴入细胞计数板计数。
活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
注意事项:台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数的准确性。
注意:初学者易犯错误: 1.水浴锅未预热或者未预热到37℃。 2.水浴锅内冻存管太多,导致传热不佳,使融化时间延长。 3.离心前忘记平衡,导致离心机损坏和细胞丢失。 4.一次复苏细胞过多,忘记更换吸头和吸管,导致细胞交叉污染。

IMR-90人胚肺成纤维细胞

传代操作步骤:

一、贴壁细胞传代

1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内。

2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞。

3.加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用。

4.用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡。

5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。

二、悬浮细胞传代

1.将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min。

2.弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液。

3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。

培养的过程中,经常见到黑色的颗粒或小黑点,这种情况是怎么引起的呢?该怎么避免呢?原因:

黑点,大概有细胞本身带的,环境有的,还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基

1、如果小黑点有增殖趋势,那么就有可能是污染了,需要处理;

2、如果小黑点没有增殖趋势,且不影响细胞生长,也不影响实验的话,则可能

 a、是“黑胶虫”,黑胶虫究竟是一种生物还是非生物,本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫,也有人认为是细菌,或是真菌,也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞,也可以生存于培养基中,依靠细胞和培养基中的营养为生,并随细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长,开始时对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候, 细胞生长就会受到影响直至死亡,严重影响了科研活动的开展和进行。以前(这个至少是10年以前),很多实验室在养细胞时用国产血清,那时的血清可能质量不过关,有所谓的“黑胶虫”,但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清,即使国产的,产品里这种现象就少见了。

 b、是细胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗运动。

 c、是核糖体,也可能是杂质ZYC3153    人肾母细胞瘤细胞    SK-NEP-1    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3154    人肾透明细胞腺癌细胞    786-O [786-0]    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3155    人肾透明细胞癌皮肤转移细胞    Caki-1    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3156    人肾细胞腺癌细胞    ACHN    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3157    人子宫内膜腺癌细胞    HEC-1-A    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3158    人绒毛膜癌细胞    JEG-3    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3159    人脐静脉细胞融合细胞    EA.ZY926    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3160    人膀胱癌细胞    5637    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3161    人输尿管上皮永生化细胞    SV-HUC-1    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3162    人滑膜肉瘤细胞    SW 982 [SW-982, SW982]    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3163    人膀胱移行细胞癌细胞    T24    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3164    人T淋巴细胞白血病细胞    HuT 78    形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3165    人结直肠腺癌细胞    COLO 320DM     形态:贴壁,悬浮均有;上皮细胞样    培养条件:MEM/F12 +10% FBS 

 

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
分享到:
版权所有©2018 杭州仟诺生物科技有限公司 备案号:浙ICP备18056619号-1
  • 扫一扫,关注我们