IEC-6大鼠小肠隐窝上皮细胞

IEC-6大鼠小肠隐窝上皮细胞

【中文缩写】    IEC-6细胞

        【中文名称】    IEC-6(大鼠小肠隐窝上皮细胞)

        【背景资料】    皮质醇可抑制该细胞的生长。该细胞表达肠上皮*抗原，在20代以前保持恒定的生长速度和细胞形态，此后生长速度迅速下降，细胞形态也发生改变。 

        【产品来源】    细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

      提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性，一般细胞培养PBS量是10%，如果出现细胞状态不良情况，可以提高PBS量到15%，待细胞稳定后，调回PBS量10%，对于初次实验者，一般细胞培养，都需要加入双抗防止细胞污染，细胞汇合度达到90%，我们开始寄送，这样可以保持细胞收到时，良好的细胞活力。复苏细胞注意事项：

1收到细胞后当天换液，全部更换成客户自己的新鲜培养基，放进培养箱，第二天再消化。

2边观察边消化，根据细胞的形态，终止消化时间，采取以半分钟间隔吹打细胞边缘，如可吹打下来，即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。

3随细胞有一份细胞操作说明书，请客户仔细查看。

4记得加1%双抗，降低被污染的概率。另外尽早冻存留种，以备后用。

5售后时间为一周，仅限于细胞本身的质量问题，而因乙方自己不当操作（不规范操作，消化过度，不加双抗导致的污染等）导致的细胞问题不在售后范畴。

6收到细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请您务必重视。

7刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞状态稳定后，再调回10%即可。

（其中1,2条针对于贴壁细胞，悬浮细胞详情请见细胞操作说明书）

        【产品】    复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）

        【产品规格】    1*10（6）

        【安全级别】    1

        【产品种属】    大鼠

        【组织来源】    小肠隐窝

        【细胞形态】    上皮细胞样

        【细胞特性】    贴壁

        "细胞培养基的选择和使用：

MEM：成分简单，贴壁细胞

DMEM：分高糖型和低糖型。

IDMEM：适合细胞密度低，生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选，DNA转染后转化细胞的筛选培养。

RPM1640：应用*泛的培养基之一。悬浮细胞培养，主要针对淋巴细胞，也适合其他细胞。

199、109培养基：成分齐全，培养效果较好。

F10培养基：适合小鼠及人类二倍体细胞培养。

F12培养基：适合单细胞分离培养及无血清培养。

McCoy’s5A培养基：特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。"    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

        【细胞】    细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

        【培养条件】    详见细胞说明书

        【传代方法】    建议1:2-1:3 两天换液一次

        【冻存条件】    详见细胞说明书

        【主要文献】    请具体查阅相关发表文章

IEC-6大鼠小肠隐窝上皮细胞

传代操作步骤：

一、贴壁细胞传代

1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。

2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。

3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。

4.胞用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。

5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。

二、悬浮细胞传代

1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。

2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。

3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

培养的过程中，经常见到黑色的颗粒或小黑点，这种情况是怎么引起的呢？该怎么避免呢？原因：

黑点，大概有细胞本身带的，环境有的，还有人身上带进细胞间的,还有就是血清和培养基

1、如果小黑点有增殖趋势，那么就有可能是污染了，需要处理；

2、如果小黑点没有增殖趋势，且不影响细胞生长，也不影响实验的话，则可能

 a、是“黑胶虫”，黑胶虫究竟是一种生物还是非生物，本身就存在争议。有人认为是从血清中来的一种原虫，也有人认为是细菌，或是真菌，也有人认为是血清中的蛋白的结晶。“黑胶虫”可寄生于动物细胞，也可以生存于培养基中，依靠细胞和培养基中的营养为生，并随细胞传代而传代。“黑胶虫”与细胞竞争性生长，开始时对细胞并没有什么影响，但当黑胶虫的数量多到一定程度的时候， 细胞生长就会受到影响直至死亡，严重影响了科研活动的开展和进行。以前（这个至少是10年以前），很多实验室在养细胞时用国产血清，那时的血清可能质量不过关，有所谓的“黑胶虫”，但是也没有明确的鉴定。但是现在的血清，即使国产的，产品里这种现象就少见了。

 b、是细胞碎片，或血清里德沉淀析出，在做布朗运动。

 c、是核糖体，也可能是杂质ZYC3153    人肾母细胞瘤细胞    SK-NEP-1    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3154    人肾透明细胞腺癌细胞    786-O [786-0]    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3155    人肾透明细胞癌皮肤转移细胞    Caki-1    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3156    人肾细胞腺癌细胞    ACHN    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3157    人子宫内膜腺癌细胞    HEC-1-A    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3158    人绒毛膜癌细胞    JEG-3    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3159    人脐静脉细胞融合细胞    EA.ZY926    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3160    人膀胱癌细胞    5637    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3161    人输尿管上皮永生化细胞    SV-HUC-1    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3162    人滑膜肉瘤细胞    SW 982 [SW-982, SW982]    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3163    人膀胱移行细胞癌细胞    T24    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3164    人T淋巴细胞白血病细胞    HuT 78    形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS 
ZYC3165    人结直肠腺癌细胞    COLO 320DM     形态：贴壁，悬浮均有；上皮细胞样    培养条件：MEM/F12 +10% FBS