HN6口腔鳞状细胞癌细胞系

HN6口腔鳞状细胞癌细胞系

冷冻保存方法一：冷冻管置于4℃300分钟→(-20℃30分钟*)→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。 
冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期储存。-20℃不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，也可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
形态特性    上皮样 
生长特性    贴壁生长
 培养条件    MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法    1:3传代，3-4天传1次
传代情况   C5
冻存条件    基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测    阴性　
STR    
同工酶
染色体

HN6口腔鳞状细胞癌细胞系

以下细胞处理方法及细胞说明书仅供参考，具体操作还需要根据到货时细胞密度，细胞生长状态等具体情况，酌情处理，如需要更详细技术指导，请及时或邮件。
需要特别指出的是：如细胞出现问题，请于48h内及时反馈，本公司将竭诚为您服务！

一．贴壁细胞  
客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。
严格无菌操作，打开细胞培养瓶。HEC-1-B-RFP荧光标记细胞株
将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。 
1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2  培养。 Hela人宫颈癌细胞
二．悬浮细胞   
1. 接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。
2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。
3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒）。
5. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2  培养。
三．一毫升小管操作方法  小管内也是此细胞。 
1. 用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）。
2. 严格无菌操作，用吸管吸出管中细胞至9ml*培养基混匀。
3. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 
4.换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO7  培养