EMT6小鼠乳腺癌细胞

EMT6小鼠乳腺癌细胞

（1）请客户收到细胞株产品后，立即对外包装，细胞冻存管，细胞培养瓶等拍照，如有疑问或问题，须在24小时内通知上海信裕生物科技有限公司，提供照片和书面说明

（2.）请客户在收到复苏细胞后，迅速将原装的细胞瓶放入细胞培养箱内静置，3-4小时后，再使用传代（注：请客户观看细胞状态后。如若细胞已经长满且贴壁好，也可静止4小时左右后就传代

（3.）请使用新配制的培养体系

（4.）请客户培养细胞前三天，须对细胞生长状态进行拍照和注明时间，若细胞生长存在质量问题，须向上海本公司提供培养生长的照片和书面说明。

（5.）请客户仔细阅读细胞说明书，提前准备好相应的培养体系，避免造成细胞质量问题

EMT6小鼠乳腺癌细胞

注：（1），观察细胞在低倍镜（4或5X物镜）下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

(2)，瓶中运输培养基不能重复再用，请换用加双抗或无双抗的新培养基，细胞冻存后，培养基中可不加任何抗生素。

(3)，有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

常见问题及解决方案

1、培养瓶有破裂，培养液有漏液：极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。  2、细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以去掉，留 10ml 培养液培养观察，细胞生长至汇合度 80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀小心勿造成气泡，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃，30分钟加热已*解冻之血清。水浴锅升到56℃后，将血清放入，待温度升高到56℃后计时，一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清包括不同批次对细胞的影响。【细胞缩写】"    EMT-6细胞
【背景资料】    见细胞说明书
【细胞来源】    细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
【代次】    P4
【规格】    复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管（两支）
"细胞冻存及复苏基本知识普及：
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。
除此之外，还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜DMSO，可使溶液冰点降低，加之在缓慢冻结条件下，细胞内水分透出，减少了冰晶形成，从而避免细胞损伤。 
采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min，当温度低于-25℃时可加速，到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。【细胞数】"    1*10（6）
【生物安全级别】    1
【生物体】    小鼠
【组织来源】    乳腺
【细胞形态】    上皮细胞样
【细胞特性】    贴壁
【细胞活力】    95％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【细胞检测】    细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌