BAF3小鼠原B细胞

细胞生长：悬浮

细胞形态：上皮细胞样

细胞数量：1×106个

细胞传代：1:3传代,2-3天传一代

细胞纯度：92.2％

细胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌

细胞冻存：液氮冻存（*培养基+10%DMSO+20%FBS）

细胞运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）

细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗

培养条件

IMDM,90%；**胎牛血清，10%

气相：空气，95%；二氧化碳，5%

温度：37摄氏度

BAF3小鼠原B细胞

传代方法

显微镜下观察细胞，当覆盖80%底面积时，进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代，那样细胞容易老化。在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶，在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞，加入5ml培养基，吹打均匀后，转移到15ml离心管中，1000rpm 离心5分钟离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:3的比例进行细胞传代培养。

传代密度均匀，有以下几点比较重要：

1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶润洗一遍（25cm2培养瓶或6孔板），弃掉胰酶，37度消化2-3分钟或室温消化5min左右，镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够，延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹，一上来就加1-2ml胰酶，结果细胞团大片脱落，虽然有后续吹打步骤，但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞，怎么掌握分寸，还待自己摸索或其他战友分享。

2.在以上基础上，我觉得细胞吹匀，这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管，加入培养液重悬混匀，吸管缓慢吹打20-30次，可配合水平摇晃离心管。

3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究，如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液，尤其像这样的小面积培养皿，液体表面有张力，细胞易于聚集在中间，所以我一般6孔板再加1ml以消除影响，吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。

NCI-H1650细胞 人非小细胞肺癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
NCI-H1688细胞 人经典小细胞肺癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
NCI-H1703细胞 人肺鳞癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
NCI-H1792细胞 人非小细胞肺癌细胞株 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
NCI-H1915细胞 人非小细胞株肺癌细胞株 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
NCI-H1975细胞 人肺腺癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
NCI-H226细胞 人肺鳞癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁
NCI-H23细胞 人非小细胞肺癌细胞 1640 + 10%FBS+ 1%P/S 
NCI-H292细胞 人肺癌细胞(淋巴结转移) 1640+10%FBS+ 1%P/S 
NCI-H3255细胞 人肺癌细胞 1640+10%FBS+1%P/S  贴壁