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gibco培养基制造步骤

发布时间:2024/5/24点击次数:610

  培养基的制备步骤可以因培养基的类型和用途而有所不同。以下是一般培养基(如LB培养基、DMEM培养基等)制备的基本步骤:

  一般步骤

  1. 准备材料

  培养基粉末或成分:根据需要选择合适的培养基类型(例如LB、DMEM等)。

  去离子水:用于溶解培养基粉末。

  pH试纸或pH计:用于调整pH值。

  盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH):用于调节pH值。

  灭菌器材:高压灭菌锅、滤膜等。

  培养基瓶或培养皿:用于储存和培养。

  2. 称量

  根据培养基配方,精确称量培养基粉末或各个成分的重量。

  3. 溶解

  将称量好的培养基粉末或成分加入适量去离子水中。

  搅拌混合直至溶解。如果使用加热搅拌器,可加热至适当温度以加速溶解。

  4. 调节pH值

  使用pH试纸或pH计测量培养基溶液的pH值。

  根据需要,加入盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)逐滴调节pH值,直到达到所需的pH值(通常为7.2-7.4)。

  5. 定容

  将培养基溶液定容至所需体积。例如,如果配制1升培养基,将溶液加去离子水定容至1000毫升。

  6. 灭菌

  将培养基溶液分装到培养基瓶中,松开瓶盖。

  将装有培养基的瓶子放入高压灭菌锅中,在121°C下灭菌15-20分钟。

  对于不耐热的成分,可在灭菌后使用无菌技术通过滤膜过滤加入培养基中。

  7. 冷却

  灭菌后,取出培养基瓶,紧闭瓶盖,放置冷却至室温。

  8. 储存

  将冷却后的培养基储存在4°C的冰箱中,短期内使用。

  特殊培养基的制备

  对于一些特殊培养基,如血琼脂培养基或选择性培养基,制备步骤可能会有所不同,需要添加特定成分(如血液、抗生素等),并且有时这些成分需要在培养基冷却到一定温度后再加入,以避免热灭活。

  注意事项

  无菌操作:在制备和处理培养基时,尽量在无菌环境中操作,以防止污染。

  精确配比:确保所有成分按配方精确称量,避免误差影响实验结果。

  记录配制过程:详细记录每次培养基制备的配比、pH值、灭菌条件等信息,以便后续实验追踪和重复。

  通过严格按照步骤操作和保持无菌环境,可以确保培养基的质量和实验结果的可靠性。


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