ProFlex 2x384 PCR操作指南

ProFlex 2x384 PCR操作指南

    ProFlex2x384PCR仪是一台配备两个独立384孔模块的超高通量PCR系统。对于初次接触这种高通量设备的用户来说，掌握ProFlex2x384PCR操作指南是确保实验顺利进行发挥设备效能的关键。384孔板操作与常规96孔板有显著不同——反应体积小、孔间密度大，对加样精度和封板密封性要求更高。本文将从前期的开机检查与耗材准备、双模块的程序独立设置、微量体系的精准加样技巧、以及运行监控与日常维护等多个维度，系统梳理ProFlex2x384PCR操作指南的标准流程。

先看整体流程：四步完成一次双模块超高通量PCR实验

    在深入展开具体操作之前，先用一个框架概括ProFlex2x384PCR操作指南的整体思路：

    第一步，开机与准备——接通电源，检查两个模块状态，清洁模块孔，准备384孔板和配套封板膜。第二步，分别为两个模块创建程序——通过触摸屏为模块A和模块B各自设置温度步骤和循环参数。第三步，精准加样与启动运行——使用多道移液器或自动化工作站加样，严格密封384孔板，分别装入对应模块，关闭热盖并启动。第四步，运行结束与收尾——取出384孔板，检查蒸发情况，清洁模块孔，查看运行记录。

    一、开机与准备工作

    ProFlex2x384PCR操作指南的第一步，是做好开机前的检查和准备。

    接通电源并开机。确认电源线连接稳固，按下前面板的电源开关。系统启动后触摸屏进入主界面，清晰显示模块A和模块B的状态图标。每个模块都有独立的温度显示和运行状态。

    检查模块与热盖。打开两个模块的热盖，分别目视检查384孔模块内是否有异物或上次实验残留的样品。384孔模块的孔间距较小，残留物更容易影响热传导。用柔软的无尘布蘸取少量70%乙醇轻轻擦拭模块表面，晾干后再关闭热盖。两个模块需分别清洁，不可混用清洁工具。

    准备耗材。ProFlex2x384的每个模块兼容标准384孔PCR板。选择质量可靠的384孔板和配套的光学封板膜。封板膜的密封性是384孔实验的关键——体积小、孔数多，密封不严会导致交叉污染和蒸发损失。

    二、创建与设置PCR程序

    程序设置是ProFlex2x384PCR操作指南的核心内容。两个模块的程序设置独立，需分别进入编辑界面。

    新建程序。在主界面点击模块A的图标，进入该模块的操作界面，选择“新建程序"。输入程序名称后开始编辑温度步骤。屏幕上显示步骤表格，每一行代表一个温度阶段。

    设置温度与时间。典型的PCR程序包括预变性（如95°C、5分钟），循环步骤（95°C变性、55°C退火、72°C延伸，各30秒），最后是延伸（72°C、5分钟）和4°C保持。384孔板的反应体积较小，温度传导更快，变性、退火和延伸的时间可以比96孔板适当缩短。

    设置循环。在编辑界面中点击“添加循环"，输入循环次数，将需要重复的步骤拖入循环体内。为模块B设置程序。返回主界面，点击模块B的图标，重复上述步骤。两个模块可设置相同程序以放大通量，也可设置不同程序分别运行不同实验。

    使用梯度功能优化退火温度

    每个384孔模块都支持独立的梯度功能。在退火步骤点击“梯度"选项，设置目标温度范围，384孔板被划分为多个区域，每个区域的退火温度独立控制。这项功能在新引物优化时非常实用。

    调用已存储程序。在主界面点击“打开"或“程序库"，从列表中选择目标程序直接调用。

    三、精准加样与装载启动

    ProFlex2x384PCR操作指南进入实际操作阶段。384孔板的加样操作是关键的环节。

    加样技巧。384孔板反应体积通常为5-10微升。使用多道移液器或自动化液体处理工作站，确保每孔的加样量一致。加样时枪头插入孔内，避免产生气泡——气泡会干扰热传导和荧光信号检测。如有气泡，短暂离心排除。封板密封。加样完成后，立即用光学封板膜密封384孔板。用压膜板或刮板沿每个孔的边缘反复刮压，确保封板膜与每孔紧密贴合。密封不严是384孔实验中导致结果异常的常见原因。装载样品。打开对应模块的热盖，将密封好的384孔板平稳放入模块中，确认板底嵌入模块、方向与标识一致。分别装载模块A和模块B的样品。关闭热盖并启动。分别压下两个模块的热盖，确认锁扣到位。回到触摸屏界面，确认各模块程序参数无误后，点击“Start"按钮启动运行。两个模块可独立启动。

    运行中的监控。运行过程中触摸屏可随时切换查看两个模块的实时温度、剩余时间和循环进度。ProFlex2x384支持通过ThermoFisherConnect平台远程监控。运行期间严禁打开热盖。

    四、运行结束与收尾

    ProFlex2x384PCR操作指南中，收尾步骤同样重要。

    取出样品。分别打开两个模块的热盖，小心取出384孔板。注意热盖和模块表面可能仍有余温。检查蒸发。观察384孔板各孔的液面是否一致。若某区域液面明显降低，说明封板密封存在问题，需排查封板膜质量或封板操作。查看运行记录。在触摸屏进入对应模块的运行记录界面查看温度变化曲线。清洁与关机。分别检查两个模块表面是否有冷凝水或溅液。如有，用无尘软布蘸取70%乙醇轻轻擦拭。如果当天不再使用，关闭电源开关。

    五、日常维护与保养

    每次使用后，用无尘软布蘸取少量70%乙醇分别擦拭两个模块表面和热盖内侧。每月检查两个模块的热盖密封圈状态。每年校准，建议对两个模块分别进行温度验证，如发现异常可联系ThermoFisher售后工程师进行专业校准。

总结

    ProFlex2x384PCR操作指南，归纳起来就是“两个模块分别设程序、精准加样密封严、分别启动互不扰、定期清洁保精准"的独立操作逻辑。双384孔模块让这台仪器一次运行最多可处理768个样本。384孔板的小体积反应体系对加样精度和封板密封性要求更高。掌握了独立操作方法和384孔板加样技巧，就能在超高通量实验中稳定发挥这台设备的效率优势。

如果您有采购ProFlex 2x384 PCR的需求，点击跳转商品页并联系我们。