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ProFlex 2x96 PCR操作指南

更新时间:2026-06-29点击次数:32

ProFlex 2x96 PCR操作指南

    ProFlex2×96PCR仪是一台拥有两个独立96孔模块的PCR系统。它能实现两台仪器的工作效率,操作的核心在于理解每个模块的独立性。以下操作指南将帮你快速上手,掌握双模块并行的技巧。

一、开机与界面导览

    开机自检:接通电源,按下前面板的电源开关,仪器启动并执行自检。

    主界面布局:触摸屏亮起后,主界面会清晰地显示模块A和模块B的状态。每个模块都有独立的控制图标和状态显示,这是进行所有操作的入口。

二、创建与设置PCR程序

    ProFlex2×96允许为两个模块设置独立的程序。

    1.进入编辑模式

    触摸屏上点击你想要设置的模块(例如模块A),进入该模块的操作界面,然后选择“新建"或“编辑"程序。

    2.设置温度步骤与循环

    程序编辑界面以表格形式展示,每一行代表一个步骤。点击温度或时间数值即可修改。

    一个典型的PCR程序包含:

    预变性:95°C,5分钟。

    循环步骤:95°C变性30秒→55°C退火30秒→72°C延伸30秒,此循环进行30-35次。

    终延伸:72°C,5分钟。

    低温保持:4°C或10°C。

    如何添加循环?

    在编辑界面点击“添加循环",设定循环数(如30),然后将变性、退火、延伸三个步骤拖入循环体内。

    3.为模块B设置程序

    返回主界面,点击模块B的图标,重复上述步骤,为其设置相同或不同的程序。

    应用技巧:你可以为模块A设置常规扩增程序,同时为模块B设置梯度优化程序,实现“一机两用"。

三、运行梯度功能(快速优化退火温度)

    每个96孔模块都支持独立的3区梯度,这是优化新引物退火温度的重要工具。

    在某个模块的程序编辑界面,找到并选中退火步骤。

    点击界面上的“梯度"或“Gradient"选项。

    设置期望的中间温度(如55°C),仪器会自动将96孔板分为上、中、下三个区域,分别设定不同的温度(如53°C,55°C,57°C)。温度差异可调。

    保存程序并运行,一次实验即可找到理想的退火温度。

四、装载样品与启动运行

    装载样品:打开仪器热盖,将配制好反应液的0.1mL或0.2mLPCR管、8联管或96孔板,平稳放入对应的模块中。

    关闭热盖并锁定:分别压下每个模块的热盖,确保听到锁扣闭合的“咔嗒"声。热盖未锁紧,模块将不会启动加热。

    启动运行:返回主界面,确认两个模块的程序设置无误后,可分别或统一点击“开始"按钮启动。仪器会先加热热盖,再进入预设程序。

    运行监控:运行中,触摸屏可随时切换查看两个模块的实时温度、剩余时间和循环进度。ProFlex2×96也支持通过ThermoFisherConnect进行远程监控。

五、实验结束与日常维护

    结束与取样:程序运行结束后,仪器自动降至4°C或室温保持。打开热盖,小心取出样品。注意热盖和模块表面可能有余温。

    数据保存:可在屏幕上查看运行记录,或通过USB导出实验数据。

    清洁与保养:

    每次使用后:用无尘布蘸取少量70%乙醇,轻轻擦拭模块孔内壁和热盖内侧,去除冷凝水和残留物。

    定期检查:每月检查一次热盖密封圈是否完好。

    年度校准:建议每年进行一次温度验证,确保实验结果的准确性。

总结

    掌握ProFlex2×96PCR仪的操作,关键在于理解其双模块独立运行和单模块梯度优化的能力。通过为两个模块分别设置程序,你可以利用这台仪器,高效完成常规扩增与条件优化的并行实验。


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