​26616蛋白marker是什么东西

26616蛋白marker是什么东西

    在蛋白质免疫印迹和凝胶电泳实验中，你可能会在凝胶或转印膜上看到一排清晰的彩色条带，它们如同实验进程中的“路标"。其中，货号为26616的预染蛋白marker，就是这样一款在生命科学研究中应用广泛、备受信赖的经典工具。

一、产品身份：它是什么？

    26616蛋白marker是ThermoScientific™旗下PageRuler™系列的一款即用型三色预染蛋白分子量标准。

    它是将10种已知分子量的标准蛋白，分别与蓝、橙、绿三种颜色的染料共价偶联后混合而成，分子量覆盖范围从10kDa到180kDa。与染料共价偶联，是预染蛋白marker的核心技术原理。

    产品规格与参考价格

    该产品提供两种包装规格：

    26616：2x250μL，适用于约50-100个凝胶泳道（5-10μL/泳道）

    26617：10x250μL，适用于高通量实验室

    参考价格：ThermoScientific价格为851.00元/盒（26616，2x250μL）

    10条彩色蛋白的具体分子量

    条带颜色分子量（kDa）

    橙色（参考带）70

    绿色（参考带）10

    蓝色180、130、100、55、40、35、25、15

    其中70kDa和10kDa分别作为高、低分子量区域的醒目参考条带，便于在电泳过程中快速定位。

    技术原理

    该产品的技术核心是共价偶联技术——将染料分子通过化学键牢固地“锁"在标准蛋白上。这种稳定的结合方式，确保了在后续的电泳、转膜等实验步骤中，彩色信号都能全程可见、不会脱落。

    储存缓冲液成分

    储存缓冲液配方为：62.5mMTris-H₃PO₄（25°C下pH7.5）、1mMEDTA、2%SDS、10mMDTT、1mMNaN₃和33%甘油。其中含有SDS和DTT等成分，使其在低温下可能出现沉淀，这正是上样前需要回温混匀的原因。

二、核心作用：它在实验中能做什么？

    在WesternBlot实验流程中，26616蛋白marker扮演着三个所需的角色：

    1.实时监控电泳进程

    为什么需要它：SDS-PAGE电泳时，普通的蛋白样品是无色的，我们无法了解电泳进行到了哪一步。

    它的作用：26616marker的三色条带全程可见，可实时判断：

    蛋白质是否已进入分离胶

    不同分子量的蛋白是否正在分开

    目标蛋白是否进入了最佳分离区域

    如果观察到Marker条带异常（如弥散、缺失），可立即中断电泳，避免浪费样品。

    2.快速评估转膜效率

    这是该产品适用功能之一。在WesternBlot转膜结束后，只需将转印后的PVDF膜或硝酸纤维素膜取出，放在白色背景上用肉眼观察：

    如果膜上能看到清晰的彩色条带→说明转膜系统工作正常，蛋白已从凝胶成功转移到膜上

    如果膜上没有条带→说明转膜失败，需要检查电极是否接反、膜是否未激活、缓冲液是否失效等

    整个过程仅需10秒左右，无需额外染色步骤，可快速定位问题，有效节省时间与试剂。

    3.大致估算目标蛋白分子量

    通过与Marker彩色条带的位置进行对比，可以对目标蛋白的分子量进行大致估算。不过，由于染料共价修饰会影响蛋白迁移率，该产品指示的是“表观分子量"，不适合用于精确定量。如需获得更精确的分子量数据，建议配合使用非预染蛋白marker进行校准。

三、使用指南：正确的操作方法

    操作步骤

    回温：从-20℃取出后，室温（20-25℃）放置5-10分钟回温，使其中可能析出的SDS重新溶解。

    混匀：上样前充分轻柔混匀（可使用手指轻弹管底或上下颠倒），切勿剧烈涡旋。

    上样：根据凝胶厚度，吸取适量Marker直接加入凝胶孔中：

    小型凝胶（厚度0.75-1.0mm）：5μL/孔

    小型凝胶（厚度1.5mm）：10μL/孔

    大型凝胶：根据厚度适当增加至10-20μL

    电泳：与待测样品一同进行SDS-PAGE电泳，全程可观察彩色条带的迁移情况。

    正确做法

    加热或煮沸无需加热，直接室温上样即可

    低温操作使用前室温回温5-10分钟，低温下SDS易析出导致条带异常

    冷冻状态直接开盖必须回温至室温后再开盖，防止冷凝水进入污染

    使用普通吸头建议使用无蛋白酶的灭菌吸头上样，防止蛋白降解

    未混匀直接上样解冻后需轻柔混匀，使沉淀充分溶解，否则可能导致条带弥散

    特别注意：该产品含有SDS，蛋白已变性，不宜作为天然蛋白分子电泳时的分子量参照标准。

四、保存方法

    保存方式有效期适用场景

    -20℃冷冻2年长期保存

    4℃冷藏约3个月短期使用（注意避免反复开盖）

    分装保存—建议根据使用频率分装，避免反复冻融，每次取一支使用

    特别提示：由于Marker中含有SDS，低温下易析出，长期冷冻保存后必须回温至室温并充分混匀后再使用，否则可能出现条带异常。

五、常见问题与排查

    Q1：电泳后条带没有分离，是什么原因？

    Marker煮沸过：该产品不可加热，煮沸会破坏蛋白结构→丢弃，换用新管

    上样量过大：加入较少的体积，或使用前用蛋白上样缓冲液适当稀释

    凝胶浓度不匹配：确认凝胶浓度适合该分子量范围（10-180kDa）

    Q2：转印到膜上的效果不理想，是什么原因？

    Marker上样量不足：根据凝胶厚度确保足够的上样量（小型凝胶5-10μL）

    大分子蛋白（>100kDa）转印不全面：需延长转膜时间或适当提高转膜电压

    膜材质不匹配：该Marker与PVDF膜、尼龙膜和硝酸纤维素膜兼容，均能观察到转印效果

    Q3：为什么在不同电泳条件下，条带位置会有偏差？

    由于预染蛋白与染料共价偶联，在不同缓冲体系中迁移率会有所差别，此为“表观分子量"，属于正常现象。建议：

    固定使用同一种电泳缓冲体系（如Tris-甘氨酸）

    如需要更精确的分子量测定，可用非预染蛋白Marker进行校准

    六、为什么它是经典之选？

    PageRuler预染蛋白Marker自2000年初第一代产品上市以来，深受全球科研人员信赖，积累了20多年深厚经验、2万篇引用文献和数百万忠实用户。用户评价中常见的关键词包括：颜色清晰，易于观测；条带锐利，分布均匀；上样量少，高性价比。

总结

    特点说明

    产品线ThermoScientific™PageRuler™预染蛋白分子量标准

    货号26616/26617

    分子量范围10-180kDa（10条蛋白）

    颜色设计三色（蓝、橙、绿），70kDa橙色参考带，10kDa绿色参考带

    主要用途监控SDS-PAGE电泳进程+评估WesternBlot转膜效率+估算蛋白分子量

    使用前准备室温回温5-10分钟，充分轻柔混匀，无需加热

    保存条件-20℃长期保存，短期可4℃（约3个月），避免反复冻融

    参考价格851.00元/盒（26616，2×250μL）

    26616蛋白marker通过将染料与标准蛋白共价结合，实现了电泳和转膜全程的可视化监控，是WesternBlot实验中一款操作便捷、信息直观的工具。理解其原理、规范使用并妥善保存，将有效提升实验效率与结果可靠性。

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