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康宁基质胶的使用方法

发布日期: 2022-04-02
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基底膜是以细胞为基础的薄层细胞外基质。康宁基质胶是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取的基底膜基质,其中含有约 60%层粘连蛋白、30% IV 胶原和 8%的巢蛋白。康宁基质胶还含有基底膜聚糖、TGF-ß、表皮生长因子、类胰岛素生长因子、组织纤溶酶原及其他生长因子。
一、使用方法
薄层凝胶法
1.依照推荐的方法解冻康宁基底膜基质。使用预冷的移液管,将康宁基底膜基质混合至均匀。
2.将培养板放置在冰上,以 50 µl/cm2向生长表面加入康宁基底膜基质。
3.将培养板放置在 37 °C ,30 分钟。
4.如果有必要的话,请在使用无血清培养基轻柔漂洗前吸出未结合的材料。请确保移液器的吸头不要刮擦包被的表面。培养板现在可以使用了。
厚层凝胶法
1.依照推荐的方法解冻康宁基底膜基质。使用预冷的移液管,将康宁基底膜基质混合至均匀。
2.将培养板放置在冰上。向康宁基底膜基质中加入细胞并使用预冷的移液管悬浮。以150-200 µl/cm2向生长表面加入康宁基底膜基质。
3.将培养板放置在 37°C,30 分钟。现在可以添加培养基了。细胞也可以培养在这一凝胶的顶部。
薄层包被法
1.依照推荐的方法解冻康宁基底膜基质。使用预冷的移液管,将康宁基底膜基质混合至均匀。
2.使用无血清培养基将康宁基底膜基质稀释到需要的浓度。对于您的应用程序,您应该完成以经验为主的研究来确定您的最适包被浓度。
3.向被包被的容器中加入稀释的康宁基底膜基质。加入的量应该足以容易地覆盖整个生长表面。在室温下培养 1 个小时。
4.吸出未结合的材料并使用无血清培养基轻柔地漂洗。培养板现在可以使用了。
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